挖掘浆细胞和浆母细胞的抗体库,可以发现用于治疗或研究目的的有用抗体。有鉴于此,美国1CellBio公司的Colin Brenan、法国巴斯德研究所的Pierre Bruhns和法国巴黎文理研究大学的Andrew D. Griffiths等研究人员,提出了一种高通量、单细胞筛选IgG分泌原代细胞的方法,以表征抗体与可溶性抗原和膜结合抗原的结合。
本文要点
1)CelliGO是一种液滴微流控系统,它结合了基于荧光的液滴内单细胞生物分析对IgG活性的高通量筛选和使用液滴内单细胞条形码逆转录对成对抗体V基因的测序。
2)分析了疫苗靶点、多功能酶或膜结合肿瘤靶点免疫的小鼠细胞的IgG谱系多样性、克隆性扩张和体细胞突变。
3)用这些抗原免疫,每只小鼠产生100-1000个IgG序列。从鉴定的序列中产生了77个重组抗体,发现93%的抗体识别可溶性抗原,14%的抗体识别膜抗原。
4)该平台还可以从体外激活的2200个分泌IgG的人记忆B细胞中回收450-900个IgG序列,显示了它的多功能性。
参考文献:
Annabelle Gérard, et al. High-throughput single-cell activity-based screening and sequencing of antibodies using droplet microfluidics. Nature Biotechnology, 2020.
DOI:10.1038/s41587-020-0466-7
https://www.nature.com/articles/s41587-020-0466-7