本文要点
1)设计了一种称为活细胞分析装置(LCAD)的微流控装置,将细胞培养在含有纳米通道的聚合物膜上的微孔阵列中。
2)细胞的局部电穿孔在细胞膜与纳米通道的界面处打开了短暂的孔,从而能够将酶提取到纳升体积的腔室中。
3)在提取室中,酶修饰固定化的底物,其活性通过自组装单层进行定量,用于基质辅助激光解吸/电离(SAMDI)质谱分析。
4)利用LCAD-SAMDI平台,证明了蛋白质向细胞的传递。接下来,研究表明,酶可以被提取,并且它们的活性可以在不损失活力的情况下进行测量。
5)最后,在多个时间点采集细胞样本,研究过氧化氢氧化后磷酸酶活性的变化。
有了这种独特的采样设备和无标签的分析格式,带有SAMDI的LCAD为监测小细胞群的细胞活动动力学提供了一种新方法。
参考文献:
Prithvijit Mukherjee, et al. Temporal Sampling of Enzymes from Live Cells by Localized Electroporation and Quantification of Activity by SAMDI Mass Spectrometry. Small, 2020.
DOI:10.1002/smll.202000584
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/smll.202000584