尽管机械力在生物学中起着至关重要的作用,但在亚100 nm分辨率尺度成像细胞力仍然是一个挑战。有鉴于此,美国埃默里大学的Khalid Salaita等研究人员,开发出了活细胞超分辨PAINT技术用于成像皮牛(pN)级别细胞牵引力量。
本文要点
1)研究人员通过整合分子张力探针和DNA点积累在纳米尺度的地形(DNA-PAINT)成像技术开发了tPAINT,用于映射~25-nm分辨率下皮牛级别机械力。
2)为实现活细胞动态张力成像,课题组设计了可逆探针,该探针有一个神秘的对接位点,只有在探针受到作用力超过机械阈值(~ 7-21 pN)时才会出现。
3)研究人员还开发了第二种不可逆tPAINT探针,其对接位点永久暴露,可以整合力随时间的历史变化,从而提供通过时间动力学信息换取更高空间分辨率的可能。
4)应用这两种类型的tPAINT探针,在活的人类血小板和老鼠胚胎成纤维细胞中映射整合素受体所受机械力。重要的是,tPAINT揭示了细胞前沿的血小板受力与Arp2/3复合物核化的动态肌动蛋白环之间的关联。
参考文献:
Joshua M. Brockman, et al. Live-cell super-resolved PAINT imaging of piconewton cellular traction forces. Nature Methods, 2020.
DOI:10.1038/s41592-020-0929-2
https://www.nature.com/articles/s41592-020-0929-2