荧光寿命成像显微技术(FLIM)和光谱成像是增加显微技术维度的两种常用方法。但是,它们的组合通常在获取和处理方面效率低下且速度慢。有鉴于此,美国加州大学欧文分校的Enrico Gratton等研究人员,开发出一种快速可靠的光谱荧光寿命成像新方法。
本文要点
1)通过技术和计算的进步,研究人员开发了一个可靠且无偏倚的频谱荧光寿命成像显微技术(S-FLIM)。
2)这个方法(Phasor S-FLIM)将真正的并行多通道数字频域电子学与多维相量方法结合在一起,以光学分辨率提取有关荧光样本光物理特性的详细精确信息。
3)为了展示Phasor S-FLIM技术的灵活性及其在生物和生物医学领域的应用,研究人员解决了四个常见但具有挑战性的问题:来自多个未知物种的光谱和生命周期特征的盲分解,生物传感器的无偏通透和无背景Förster共振能量转移分析,活细胞中环境敏感探针的光物理特征以及肿瘤球体中的平行四色FLIM成像。
参考文献:
Lorenzo Scipioni, et al. Phasor S-FLIM: a new paradigm for fast and robust spectral fluorescence lifetime imaging. Nature Methods, 2021.
DOI:10.1038/s41592-021-01108-4
https://www.nature.com/articles/s41592-021-01108-4