由于文库制备过程中捕获、连接和扩增中的序列依赖性偏差，当前的下一代RNA-seq方法无法提供样品中小RNA的准确定量。有鉴于此，美国麻省理工学院的Bo Cao、Peter C. Dedon等研究人员，开发出AQRNA-seq技术，实现细胞小RNA图谱的定量绘制。

本文要点

1）研究人员提出了一种方法，即绝对定量RNA测序（AQRNA-seq），该方法可最大程度地减少偏差，并为样品中所有小RNA的测序读取数和拷贝数之间提供直接的线性相关性。

2）使用963个成员的microRNA参考文库，不同长度的寡核苷酸标准品和RNA印迹，研究人员对文库的制备和数据处理进行了优化和验证。

3）将AQRNA-seq应用到一组人类癌细胞中，研究人员发现在癌症进展过程中可检测到超过800种可检测到的miRNA。

4）而在应用于细菌转移RNA库的过程中，尽管面临着二级结构和大量修饰的挑战，研究人员揭示出tRNA同受体水平的80倍变化、应激诱导的位点特异性tRNA片段化、定量修饰图谱以及应激诱导的且tRNA驱动的密码子偏向翻译。

本文研究的AQRNA-seq技术提供了一种通用的方法来定量绘制细胞中的小RNA图谱。

参考文献：

Jennifer F. Hu, et al. Quantitative mapping of the cellular small RNA landscape with AQRNA-seq. Nature Biotechnology, 2021.

DOI：10.1038/s41587-021-00874-y

https://www.nature.com/articles/s41587-021-00874-y