三磷酸腺苷(ATP)和过氧亚硝酸盐(ONOO–)浓度的变化与许多疾病相关,包括缺血再灌注损伤和药物诱导的肝损伤。有鉴于此,山东师范大学的李平和Tony D. James、美国得州大学奥斯汀分校的Jonathan L. Sessler、上海师范大学的Chusen Huang、河南师范大学的Hua Zhang、华东理工大学的Hai-Hao Han等研究人员,报道了同时监测过氧亚硝酸盐和5′三磷酸腺苷的双通道荧光探针在细胞中的应用。
本文要点
1)研究人员开发了一种荧光探针ATP-LW,它能够同时检测ONOO-和ATP。
2)ONOO–选择性氧化ATP-LW的硼酸片纳醇酯,得到荧光4-羟基-1,8-萘酰亚胺产品NA-OH(λex=450 nm,λem=562 nm或λex=488 nm,λem=568 nm)。相反,ATP与ATP-LW的结合诱导罗丹明螺旋内酰胺环的开环以生成高发射产物(λex=520 nm,λem=587 nm)。
3)由于ONOO-和ATP产品之间的发射差异,ATP-LW能够在绿色通道(λex=488 nm,λem=500–575 nm)和红色通道(λex=514 nm,λem=575–650 nm)中监测ONOO-水平。
4)在细胞成像实验中,使用肝细胞(HL-7702细胞)证明了ATP-LW作为ONOO-和ATP组合探针的使用。
5)用寡霉素A(ATP合酶抑制剂)处理HL-7702细胞,导致红通道信号强度降低,绿通道信号强度增加,ATP浓度降低。在SIN-1(外源性ONOO-供体)的存在下也观察到类似的荧光变化。
参考文献:
Luling Wu, et al. Dual-Channel Fluorescent Probe for the Simultaneous Monitoring of Peroxynitrite and Adenosine-5′-triphosphate in Cellular Applications. JACS, 2021.
DOI:10.1021/jacs.1c07954
https://pubs.acs.org/doi/10.1021/jacs.1c07954