NanoLuc荧光素酶(NLuc)及其底物(FRZ)极大地改变了生物发光(BL)的成像模式。然而,NLuc−FRZ荧光素酶−荧光素组合在用于哺乳动物的组织成像时仍会受到蓝光发射的低组织穿透性的影响。有鉴于此,弗吉尼亚大学艾辉旺教授开发了一种NLuc突变体QLuc,它能够催化氧化QTZ荧光素,进而在~585 nm处产生明亮的红移发射峰。
本文要点:
(1)与其他小的单域NLuc突变体相比,这种琥珀色发光的荧光素酶能够在活体小鼠的深层组织靶标成像方面表现出更好的性能。利用这种新型的生物发光探针,实验也进一步开发了体内免疫生物发光成像(immunoBLI)策略,该策略可使用单链可变抗体片段(scFv)和QLuc的融合蛋白以在异种移植小鼠模型中对肿瘤相关抗原进行分子成像。
(2)作为具有最远红移的NLuc变体之一,QLuc有望在非侵入性哺乳动物成像领域中得到广泛应用。此外,immunoBLI策略也能够作为免疫荧光成像和免疫正电子发射断层扫描(immunoPET)的补充,从而为基础和临床前研究提供一种方便和非放射性的分子成像工具。
Ying Xiong. et al. Engineered Amber-Emitting Nano Luciferase and Its Use for Immunobioluminescence Imaging In Vivo. Journal of the American Chemical Society. 2022
DOI: 10.1021/jacs.2c02320
https://pubs.acs.org/doi/10.1021/jacs.2c02320