对膜受损细胞进行选择性标记不仅能够在培养物中识别死细胞，也有助于在活体病理中实现对膜屏障功能障碍的成像。目前，大多数膜通透性染色剂是永久性染色或荧光染料，需要进行洗涤以除去未被摄取的胞外背景信号，从而达到良好的成像对比度。其他染色剂则是结合DNA的环境依赖性荧光团，缺乏模块化设计，具有潜在毒性，并且只能检测含有细胞核的细胞体积的通透性(即不能在体内显示受损体积，也无法成像无核细胞或隔室)。有鉴于此，慕尼黑大学Oliver Thorn-Seshold开发了一种模块化荧光探针，其可以显示受损细胞的整个细胞质体积，并且背景荧光接近于零，因此不需要清洗。

本文要点：

（1）实验构建了一种特异性二磺化荧光探针，其只会进入细胞膜受损的细胞，随后可被酶激活并标记细胞。研究发现，酯酶探针MDG1是一种可靠的工具，其可以显示被生物、生化或物理膜损伤通透性的活细胞，并且能够用于多色显微镜成像。此外，研究者也通过改进其水解稳定性进一步确认了这种构建方法的模块性。

（2）实验结果表明，MDG探针能够显示轴突膜损伤(DNA荧光团无法实现)，也可以在体内胚胎中区分以细胞为基础的损伤情况。综上所述，该研究构建的MDG可作为一种强大的模块化工具以实现对膜损伤的免洗活体成像，并且能够为选择性地将药物货物递送到受损细胞中提供指导，其在选择性诊断和膜受损细胞治疗等方面具有广阔的应用前景。

Philipp Mauker. et al. Fluorogenic Chemical Probes for Wash-free Imaging of Cell Membrane Damage in Ferroptosis, Necrosis, and Axon Injury. Journal of the American Chemical Society. 2024

DOI: 10.1021/jacs.3c07662

https://pubs.acs.org/doi/10.1021/jacs.3c07662