控制CRISPR–Cas9系统的活性对其临床应用至关重要，尽管Cas9的构象动力学可以控制其酶活性，但Cas9如何影响两个核酸酶结构域的催化过程仍不明确。在这里，佛罗里达州立大学Li Hong报道了活性溶纤酸杆菌Cas9复合物在反应路径上的五种冷冻电子显微镜结构 ，相应的分辨率为2.2–2.9Å。

本文要点：

1) 作者观察到，由同源DNA触发的一个核酸酶结构域的大移动会导致金属配位和催化所需的另一个结构域的活性位点发生显著变化。此外，构象使反应中间体同步，从而实现两条DNA链的偶联切割。

2) 与构象在组织活性位点中的作用一致，对金属配位残基的调整会导致细胞中溶纤曲霉Cas9和常用化脓性链球菌Cas9的金属特异性改变。

参考文献：

Anuska Das et.al Coupled catalytic states and the role of metal coordination in Cas9 Nature Catalysis 2023

DOI: 10.1038/s41929-023-01031-1

https://doi.org/10.1038/s41929-023-01031-1