缺乏对镜像（D-）蛋白进行测序的有效方法阻碍了镜像生物系统和相关应用的发展。虽然天然手性（L-）蛋白可以通过自下而上液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）进行测序，但采用相同策略对长D-肽和D-蛋白进行测序需要在质谱分析前用位点特异性D-蛋白酶进行消化。

西湖大学Ting F. Zhu等应用固相肽合成和天然化学连接来化学合成胰蛋白酶的镜像版本，这是一种广泛用于位点特异性蛋白质消化的蛋白酶。

本文要点：

（1）

使用镜像胰蛋白酶消化和LC–MS/MS，作者对镜像大亚基核糖体蛋白（L25）和镜像硫化叶菌P2 DNA聚合酶IV（dpo 4）进行了测序，并区分了D-Dpo4的不同突变体。作者还在50个氨基酸的长D肽中执行数字信息的写入和读取。

（2）

因此，镜像胰蛋白酶消化与液相色谱-串联质谱联用可能会促进D-肽和D-蛋白作为潜在治疗和信息工具的实际应用。

参考文献:

Zhang, G., Zhu, T.F. Mirror-image trypsin digestion and sequencing of D-proteins. Nat. Chem. (2024).

DOI: 10.1038/s41557-023-01411-x

https://doi.org/10.1038/s41557-023-01411-x