荧光共振能量转移(FRET)报告子通常用于核酸扩增测试的最后阶段,以指示核酸靶标的存在,其中荧光通过切割FRET报告子的核酸酶恢复。然而,在制造过程中对双重标记和纯化的需要导致FRET报告子的高成本。在这里,得克萨斯大学奥斯汀分校Hsin-Chih Yeh报道了一种低成本的银纳米团簇报告子,它不依赖于FRET作为开/关切换机制,而是依赖于在核酸酶消化时导致荧光颜色变化的团簇转化过程。
本文要点:
1) 在报告子切割时,作者观察到发射中的一个90nm红移,这是通过简单的供体猝灭剂FRET报告子无法实现的结果。电喷雾电离-质谱分析结果表明,银纳米团簇从Ag13到Ag10的化学计量变化是报告基因消化后观察到的发射颜色变化的原因。
2) 该研究表明,DNA模板化的银纳米簇探针可以成为检测核酸酶活性的多功能报告子,并为核酸酶和金属DNA纳米材料之间的相互作用提供了重要见解。
Soonwoo Hong et.al A non-FRET DNA reporter that changes fluorescence colour upon nuclease digestion Nature Nanotechnology 2024
DOI: 10.1038/s41565-024-01612-6
https://doi.org/10.1038/s41565-024-01612-6