确定标记与靶比，也称为标记程度（DOL），对于定量荧光显微镜至关重要，具有最小非特异性标记的高DOL有利于荧光显微镜表征。然而，目前还没有用于测量细胞特异性标记效率的强大、通用和易于使用的工具。鉴于此，来自德国海德堡大学的Dirk-Peter Herten等人开发了一种名为蛋白质标签DOL（ProDOL）的DOL测定技术。

文章要点：

1) 该研究开发的这一技术能够快速定量和优化蛋白质标签标记，通过使用ProDOL，研究可以很容易地评估影响标记效率的各种因素，包括底物类型、孵育时间和浓度，以及样品固定和细胞类型；

2) 此外，该研究通过应用ProDOL来研究人类免疫缺陷病毒-1致病因子Nef如何调节CD4 T细胞活化，测量信号微簇中衔接蛋白SLP-76的总拷贝数和活化拷贝数，研究证实ProDOL是一种通用且高效的标记校准工具，能够确定标记效率、优化策略和定量蛋白质化学计量。

参考资料：

Tashev, S.A., Euchner, J., Yserentant, K. et al. ProDOL: a general method to determine the degree of labeling for staining optimization and molecular counting. Nat Methods (2024).

10.1038/s41592-024-02376-6

https://doi.org/10.1038/s41592-024-02376-6